cpp条件位置偏爱实验方法
CPP实验是评价觅药行为或心理渴求的经典动物模型,是一种相对简单的实验手段。CPP实验早报道见于1940年的黑猩猩吗啡依赖行为实验,该研究说明吗啡具有依赖性,能强化动物行为。1957年Beach发现动物的天然偏好会影响CPP实验结果。1976年Rossi和Reid将停留时问(Duration Time)作为实验动物的偏好指标,到目前为比他们的实验流程被大家认同,并且不断进行修改和完善,自20世纪80年代以来CPP实验在药物滥用研究领域得到广泛应用。
1.1实验原理
根据巴甫洛夫的条件反射学说,如果把奖赏刺激与某个特定的非奖赏性条件刺激(如某特定环境)反复练习之后,后者便可获得奖赏特性。反复几次将动物给药后放在一个特定的环境中,如药物具有奖赏效应,则特定环境就会具有了奖赏效应的特性,动物在不给药的情况下依然表现出对该特定环境的偏爱。
1.2实验设备
典型的CPP实验设备一般为两个或三个互通的实验箱,也有四箱或开场式的装置。每个箱体设置的环境(如箱体颜色、材质案有着极大的差异,使动物把不同的环境线索与给予的实验处理即非条件刺激进行匹配。
1.3实验方法
CPP实验主要用啮齿类动物,如大鼠、小鼠及基因敲除鼠作为研究对象,给药途径有腹腔注射、静脉注射、皮下注射等,主要取决于药物的特性,以及人类摄药方式。CPP实验一般分为前测、训练和测试。
1.3.1前测阶段在正式训练前,去掉箱体之间的隔板,将实验动物放入实验箱中使其自由活动,记录在各箱的停留时间。这一阶段可以使动物熟悉实验装置,减少新奇感与应激作用,同时可以测查非条件性偏爱来筛选动物。前测阶段在不同实验室设计各不相同,一般为1-5次,每次10-15分钟。
1.3.2训练阶段箱体之间放置隔板,使动物只能停留在放入的箱体。实验动物注射药物后放置在伴药箱中,20-40分钟后取出。同天间隔4-8小时或者第二天的同一时间进行对照实验,
给实验动物注射对照剂(如生理盐水),放置在非伴药箱中,实验进行时间与前次相同。CPP的形成仅需1一2次训练即可完成,但是多次训练有利于稳定实验动物的状态。
1.3.3测试阶段训练结束后,对实验动物进行测试。实验时动物不经任何药物处理,将动物放置在过道上,拿走隔板,动物可以在各箱中自由穿梭。测试一般进行一次,测试时间依据药物作用时间而定,一般为15分钟。
常用的观察指标是停留时间,如果实验动物在给药箱内停留的时间较长,表示它对该箱有偏爱,说明受试药物有奖赏作用,动物对其有精神依赖性,反之则认为受试药物有厌恶性。计算机辅助CPP实验系统,可以视频记录实验动物的活动距离和穿梭次数来衡量动物给药引起的运动活性变化。1984年,Bardo等发现在大鼠吗啡诱导的CPP实验中,与自然消退相比,消退训练后在伴药箱内停留的总时间不变,而每次进入伴药箱停留的时间缩短,即穿梭次数增多,说明自然消退与消退寻练可能对动物的运动行为有不同影响。动物在伴药箱的停留时间与总活动距离、穿梭次数之间相关性很弱,1992年Cun-ningham等学者将阿片剂注射到伏隔核来对运动活性和奖赏相关反应进行比较,结论说明之间无显著关联,这种不相关或弱相关现象提示,药物的奖赏效应与运动活性可能由不同的脑区和神经机制控制。